Poly mediert Cre recombinase påvirket Rac1 knock-out
Poly terapi førte til en Z redusert mengde Rac1 DNA i levervevet. Western blot basert analyse viste et underskudd på Rac1 protein uttrykk med om lag 757-200, som ble bekreftet av immunhistokjemisk analyse. I tillegg lever, ble poly mediert Cre recombinase påvirket Rac1 knock-out også lagt merke til i benmarg, milt, lunger, perifert blod, hjerte og nyrer, men ingen åpenbar Rac1 fjerning var merkbar i tarmen og hjernen. DNA skade som følge av hemming av topoisomerase II er regnet som den mest relevante anticancer aftereffect av antracyklin biprodukt doxorubicinand kan også være av betydning for normal vev skade som følge av antracykliner.
Tidligere kjøpte in vitro og in vivo-data indikerte at Rac1 signalering er svært viktig for doxorubicininduced stressresponser og celledød av endotelceller, samt for hjerte og lever vev. Her ønsket vi å granske denne teorien utnytte tidligere nevnte genetiske musemodell, som er preget av en poly induserbar lever knockout av Rac1. S139 fosforylering av histon H2AX, som er en generelt akseptert markør DNA-dobbeltstrengbrudd, ble overvåket, for å analysere virkningen av Rac1 på akutt leverskade etter doxorubicin behandling.
Som demonstrert av både vestlige blotbased analyse av gH2AX protein mengder og immunfluorescens basert påvisning av gH2AX foci, oppdaget vi at Rac1 mangel betydelig beskytter mot doxorubicin som analysert 48 og 96 timer etter én eksponering for ulike doser av doxorubicin indusert dannelse av DSB sin. Til sammen er Rac1 signale nødvendig for doxorubicin å utløse gentoksisitet i en akutt setting. Til sammenligning IR indusert lever gH2AX fosforylering, som ble analysert 72 timer etter hele kroppen bestråling av mus med 6 Gy ble ikke endret da Rac1 ble slettet. Nivået av gH2AX foki var 0. 8-1. 2 foci /celle i tillegg til status for hepatocytter. Også i ikke-bestrålte dyr, mengden av hepatisk gH2AX foki var meget lik i villtype og Rac1 mindreverdig dyr. Ivacaftor prissammenligning
omdømme også påvirke ikke H2AX fosforylering til tidligere tider følgende bestråling. Over alt, viser dataene at mangel på Rac1 ikke resulterer i en generell hepatoprotection mot de akutte DNA-ødeleggende virkninger av genotoxins. Ganske, er genoprotection unik for doxorubicin og omfatter ikke IR. Relatert megler visse forskjeller er allerede observert etter antracyklin og IR behandling av lovastatin forbehandlet cellsand skapninger. Effekten av nedsatt lever Rac1 knockout på basal og gentoksisk spenning indusert mRNA uttrykk.
For å undersøke konsekvensene av Rac1 knock-out på basal og genotoxininduced mRNA uttrykk av gener som er aktive i reguleringen av angst reaksjoner, delvis tilpasset PCR utvalg ble brukt. Dette området tillater kvantitativ analyse av mRNA-ekspresjon av 94 utvalgte gener involvert i DNA-reparasjon, DNA-skade respons, cellesyklusprogresjon og død. Under normale omstendigheter, ble i alt sju gener funnet å være annerledes forvaltes i levervev når Rac1 knockout mus ble veid mot kontroll. Deretter undersøkte vi påvirkning av Rac1 på alvorlig lever stress respons utløst av agenter, som er den antracyklin derivatet doxorubicin og ioniserende stråling.
Som besluttet 48 timer etter at jeg. s. Behandling av doxorubicin, Rac1 mangel skyldes hemming av doksorubicin vekket mRNA-ekspresjon av cdkn1a, hspa1b, icam1 og topoIIb mens den økte mRNA-ekspresjon av DNA-reparasjon genet rad51 og den cellesyklus assosiert kinase wee1. Angående IR-induserte endringer i genekspresjon etter 24 timer etter TBI, Rac1 mangel spesielt resulterte i hemmende effekter, særlig IR-indusert mRNA-ekspresjon av DNA-reparasjonsgener fen1, topoIIb, WRN og XPC, den cellesyklusregulerende gener cdkn1a og ccne1 og varmen sjokk genet hspa1b.
Tidligere:Trametinib ble opprettholdt i nano-kompositt behandlet cells
Neste:Ras forbundet C3 botulinum substrat stressactivated protein kinases
-
-
-
-
Tidligere:Trametinib ble opprettholdt i nano-kompositt behandlet cells
Neste:Ras forbundet C3 botulinum substrat stressactivated protein kinases
