Familie ligaser | Pi K PTEN-Mtorc signale Reguler Nedd
PTEN er et lipid fosfatase som konverterer fosfatidylinositol-3, 4, 5-trisphosphate (PtdInsP3) inn fosfatidylinositol-4, 5-bisfosfat (PtdInsP2) og motvirker fosfoinositid 3-kinase (PI3K) -avhengig signalering. Nedd4-1 (nevrale forløper celle uttrykt, utviklingshemmede nedregulert 4-1) var den første E3 ligase for å bli innblandet i PTEN ubiquitinering. Nedd4-1 kan katalysere mono- og polyubiquitination av PTEN, som fører til kjernekraft import av PTEN og PTEN degradering, d og dermed regulere aksonal vekst i nerveceller.
Forrige in vitro og in vivo Resultatene viser at Nedd4-familien E3 ligaser Nedd4-1 og Nedd4-2 spille en evolusjonært konservert rolle i regulering av axon morphogenesis.
Først viser vi at PTEN grenser Nedd4-1 protein nivåer ved å modulere aktiviteten av mTORC1, et proteinkompleks som styrer proteinsyntese og cellevekst.
Deretter ligaser Nedd4-familien E3 Nedd4-1 og Nedd4-2 fremme axon vekst i pattedyrsentralnervesystemet nevroner. Uttrykket, ubiquitinering, er lokalisering, eller fosfatase aktivitet av PTEN ikke endret.
Motsatt, PTEN regulerer negativt Nedd4-1 uttrykk på translasjonsforskning nivå. Og at pattedyr Nedd4-1 og Nedd4-2 regulere axon vekst.
Våre data viser at Nedd4-familien E3 ligaser fremme aksonal vekst og forgrening i utviklings hjernen hos pattedyr, wherePten er ikke et relevant underlag. I stedet styrer PTEN nevritt vekst ved å regulere Nedd4-1 uttrykk.
Retinoid homeostase er avgjørende for normal fosterutvikling. Nøkkel regulatoriske faktorer som medierer de pleiotrope effekter av RA inkluderer flere klasser av RA-bindende transkripsjonsfaktorer, retinsyrereseptorer Rara, R R, og RARg. SIRT1, en kjernefysisk NAD + -avhengig protein deacetylase, er den mest konserverte medlem av Sirtuin familien av enzymer.
For det første viser vi at SIRT1 de? Vitet er forbundet med høyere RA signal- og utvikling av defekter i mus. Vi har identifisert? Ed både CRABPI og CRABPII som hyper-acetylert proteiner i SIRT1 null mus embryonale? Broblasts (MEFs) i en global stabil isotop merking av aminosyrer i cellekultur (SILAC) -basert analyse av Lys acetylering.
Deretter undersøkte vi om SIRT1 kan fysisk samhandle med CRABPs. Vi analyserte subcellulære lokaliseringene av HA-CRABPII i WT og SIRT1 KO MEFs ved immun? Uorescent farging CRABPII er en mobil RA transportør som translocates fra cytosol inn i kjernen på RA binding for å aktivere atom RA reseptorer.
Vi viser at RA-mediert acetylering ofCrabpii ved K102 er essensiell for dens atom akkumulering og påfølgende aktivering av RA signalering. SIRT1 samhandler med og deacetylates CRABPII, regulerer sin subcellulære lokalisering.
Til slutt, sletting av SIRT1 fører til økt RA-indusert Mesc differensiering.
I sammendraget, vi har vist at gjennom deacetylering CRABPII, SIRT1 spiller en viktig rolle i reguleringen av celle RA signalering og Mesc pluripotency. Dette SIRT1 /CRABPII /RAR signalkaskade vil gi en måte å studere gen-miljø interaksjoner som påvirker dyre utvikling.
