Hva er trinnene i ELISA prosedyre?

ELISA-prosedyre begynner i klinikken, med en blodprøve blir tatt fra pasienten. En rekke tiltak blir deretter fulgt ved bruk av ELISA-testsett i laboratoriet. Testen vil påvise nærvær av antistoffer eller antigener for en sykdom, slik som HIV, i blodet. Trinnene omfatter tilsetning av forskjellige stoffer og vasking og resultatene er vanligvis målt ved hjelp av en fargeendring.

enzymbundet immunosorbent analyse (ELISA), som også er referert til som enzymimmunoanalyse (EIA), blir benyttet som en diagnostisk test. Det er mest kjent som en diagnostisk test for HIV. Testplaten består vanligvis av 96 små brønner inn i hvilket et spesifikt antigen immobilisert. Dersom antistoff er tilstede i serumprøven, vil det binde seg til antigenet, slik at detektering via de ulike trinnene i den ELISA-prosedyre.

Det første trinn i ELISA prosedyren er å oppnå en prøve fra pasienten. Dette gjøres ved en sykepleier, under sterile betingelser. Blodet blir vanligvis tatt fra en vene i armen eller hånden. En årepresse er plassert på armen for å svelle venen og gjør fremgangsmåten enklere, og huden er renset hvor nålen vil bli satt inn. En liten stikk kan kjennes som nålen går inn og blodet samles i et sterilt rør.
Ad

Etter at blodprøven er tatt, den overføres til laboratoriet hvor resten av ELISA-prosedyre vil utføres av en lab tekniker. Blodprøven blir først tilsatt til brønnene i ELISA-platen. Dersom det spesifikke antistoff er tilstede, bindes det til antigenet. Platen blir deretter vasket, ved anvendelse av en buffer, for å fjerne ubundne antistoffer.

Et andre antistoff, vanligvis av animalsk opprinnelse, som har et enzym som er festet til det, blir så tilsatt, noe som vil bindes til antistoff-antigen-kompleks. Platen blir igjen vasket, for å fjerne overskudd. Enzymet er farge-reaktive når et substrat tilsettes ved slutten av ELISA-metoden. Det er måling av graden av fargeendring som gir resultatet.

ELISA-metoden må følges nøye for å unngå falske resultater. I de fleste ELISA-plater en positiv og negativ kontroll er inkludert, for å minimalisere slike falske resultater. Ved testing for HIV, vil et positivt resultat som regel bli fulgt opp av et sekund, bekreftende, test, ofte av en annen type, for eksempel en Western Blot.