Hva er ELISA-protokollen?

En enzymbundet immunosorbent assay (ELISA) er en vanlig test anvendes i immunologi å påvise antigener eller antistoffer. Antigener provosere en immunsystem reaksjon - med andre ord, de forårsaker sykdommer. ELISA anvendes for å påvise mange bakterielle og virale antigener, inkludert humant immunsviktvirus (HIV), malaria, kolera, meslinger, kusma og. En litt annen ELISA-protokollen
kan anvendes for å påvise antistoffer mot disse og mange andre patogener. En ELISA-protokollen er den trinnvise fremgangsmåten for å utføre en spesifikk ELISA.

Selv om ELISA-protokollen varierer litt, avhengig av hvilken type av ELISA som utføres, er det grunnleggende konseptet den samme for alle av dem. ELISA avhenger av enzymbundet antistoff, også kalt antiglobulins
. Et signal molekyl knyttet til disse antiglobulins bevirker et substrat tilsettes under analysen for å endre farge, hvis det ønskede antigen eller antistoff som er til stede. Mengden av antigen eller antistoff som er tilstede er proporsjonal med mengden av fargeendring, noe som kan måles med en elektronisk plateleser.

Det finnes tre hovedtyper av ELISA. En direkte
ELISA er vanligvis brukes til å oppdage antigener i stedet for antistoffer. Dette er den enkleste ELISA-protokollen, som enzym-bundne antistoffet bindes direkte til det ønskede antigen. Underlaget er så tilsatt for å bestemme mengden av antigen til stede
Ad

En indirekte
ELISA brukes til å påvise antistoffer, mens en annen type indirekte ELISA -. Kalles en smørbrød
ELISA - kan bli brukt til å påvise antigener. En sandwich-ELISA-protokollen krever to antistoffer, kalt fangst og deteksjons antistoffer, bindes til det ønskede antigen. En antiglobulin tilsettes, som bindes til deteksjonsantistoff, og substratet tilsettes. Den indirekte ELISA følger en lignende protokoll, men bruker en fangst antigen snarere enn et fangst-antistoff for å detektere det ønskede antistoff.

konkurrerende ELISA
blir ofte brukt for å detektere antigener som er til stede i lave konsentrasjoner, fordi det er en veldig sensitiv analyse. I motsetning til de andre ELISA-protokoller bruker konkurrerende ELISA en enzym-bundet antigen i stedet for et antistoff, og en litt annen kvantifisering metode. I det, av prøven som inneholder antigenet som skal påvises og den enzymbundne antigen er begge tilsettes til et antistoff, og de to antigenene konkurrere om antistoff-bindingssteder. Når substratet er lagt til, er fargeendring er større, med en høyere andel av bundne enzymbundne antigener for å bundne prøve antigener. Det vil si at høyere fargeendring detekteres ved lavere konsentrasjoner av prøveantigenet, som er det som gjør denne metoden så følsomme.