Effekter av Baculovirus DNA Of An Insect

Baculovirus er en vert bestemt insekt patogen, som er karakteristisk identifisert ved arrestert vertscellesyklus på infeksjon. Dette er en studie som undersøker eksperiment hvor viruset når sine virkninger av cellepatologi (CPE) på vertsinsektceller slik som vakuolisering, polyeder, celle utvidelse og granulering på sin transfeksjon og infeksjon. En effektiv transfeksjon prosedyre for verts Sf9 (Spodopterafrugiperda) celler er analysert på gel elektroforese teknikk for å observere effekter på SF9 celler (Dwight, 2010). Denne prosessen bruker en gel agarose for å skille DNA-fragmentene på basis av deres molekylstørrelser og visualisere dem gjennom et U.V. (Ultra-Violet) lys trans-illuminator etter et fluorescerende fargestoff farging (for eksempel etidiumbromid) sikret studie forsøk viser at det er en indikasjon på cellepatologi (CPE) i den positive kontrollen og transfekterte celler i motsetning til den normale cellestrukturen i negativ kontroll hvor det ikke var noen innføring av baculovirus genomet AcNPV (Autographa californicanuclear polyhedrosis virus). Den oppnådde Konklusjonen er at en transfeksjon av en baculovirus-DNA for å være vert-insektceller fører til smittsom baculovirus avkom på Sf9 cells.Baculovirus er et viralt patogen som går inn i vertssystemet for visse insekter, som fører til en endelig forårsake en sykdom ved generering av cellepatologi . Viruset infiserer spesifikke bestander av insekter og dette har ført til deres omfattende bruk som selektive biocid på målet plantevernmidler over lang tid (Mohan og Gobinathan, 1992) sikret spesifisitet av disse virusinfeksjon til insekter har oppmuntret forskningsstudier til rette genetiske modifikasjon av det virale genom, slik at det oppnås virulens for visse målrettet vert. Siden hyppig bruk av kjemiske plantevernmidler i vårt moderne landbruk har blitt tilskrevet som en viktig fare eksponering for menneskers og dyrs helse, er utvikling av biologiske plantevernmidler svært anbefales. Dette er en vesentlig faktor for forskningsstudier formulert for å analysere infeksjon trender av biologiske patogener som baculovirus på verts insekter å være developed.These forplikte smittsomme virus er genetisk kodet av stavformede neucleocapsids, som eksisterer i form av en dobbel strandet, sirkulære, super kveil-genet, er omgitt av et polyeder matrise. Baculovirus infeksjon hos insekter fører til en induksjon av membranbundne strukturer i vertscelle-nucleoplasms således senere avbrytelse av normal cellefysiologi. Den biokjemiske forklaring på hvordan disse membranstrukturer dannes og reguleres er utilstrekkelig; imidlertid cellesyklus foreslått å ha en innflytelsesrik rolle i reguleringen av disse intranuclear membraner på basis av de normale dynamikken i cellulære membraner og det kjernefysiske konvolutten model.Surrounding de innleirede virioner denne polyhedron matrisen bidrar til beskyttelse av genetisk materiale (viralt DNA ) før de innføres i vertscellen for å initiere en infeksjon. De okkluderte baculovirus-virioner kan forårsake infeksjoner midgut imidlertid på penetrasjon inn i vertscellene de kaster denne matrisen, en prosess som muliggjør celle til celle infeksjoner (George, 2011). Et antall tidligere forsøk er koblet celle patologi forårsaket av virale infeksjoner til cellesyklus avbrytelse spesielt ved det stadiet av cellereplikasjon, hvor cellesyklusen av vertscellen blir arrestert. Til tross for dette ble arrestert i celle multiplikasjon virusgenomet fortsetter sin multiplikasjon og dermed heve en spørring på avhengighet av vertscelle mitose i viral multiplikasjon. For eksempel baculovirus-genomet har blitt benyttet i utvikling av Oryctes baculovirus som er en viral biocid som brukes for kontroll av Oryctes nesehorn insekt pests.It er nødvendig for karakterisering av baculovirus genetisk materiale for å forstå dens effekter til en vertscelle Sf9 og dette vil øke utviklingen av en rekke mål viral biocid av insekt skadedyr som Oryctes neshorn. Som målet med denne studien er å undersøke theeffect av baculovirus innføring i cellesyklusen Spodopterafrugiperda (Sf9) vertsceller, tar vi sikte på å sjekke mobilnettet fysiologi i Sf9 celle fasen distribusjon som er enda i suspensjonskulturer (Mohan og Gobinathan, 1992 ) .At er omtrent 29% av cellene arein G1, 33% i S, og 36% i G2 /M-fase, med varigheten av begge G1and S faser være i en approximity av 6 timer mens varigheten av G2 /M fasen kombinert blir ca 8 timer. På Sf9-celler infeksjon med AcMNPV, viser omtrent 84% av eksponerte hostcellswere arrestert i G2 /M fasen av 18-24 timer etter viral introduction.ResultsThe resultatene oppnådd at både den positive kontrollen, og transfekterte celler det er tegn på infeksjon, og denne er kjennetegnet av celle patologisk endringer, for eksempel korning, vakuolisering, polyhedron og celle utvidelse. På den annen side den negative kontroll hvor ingen introduksjon av virusgenomet ble det ikke viser noen tegn til celle Pathology (CPE). Selv etter at arrest av vertscellene i G2 /M fase, fortsatte den virale DNA for å gjennomgå replikasjon som indikert ved CPE på Sf9-celler. Den virus-avkom bringer unike intranuclear mikrovesikler på vertsceller, og det ser ut til at dette arrest i G2 /M fasen av mitosen er vesentlig for optimal modning og montering av virusAs fosfat skjelettet av DNA-strukturen er negativt ladet i henhold til nøytral PH, når introdusert i et elektrisk potensial det er tiltrukket til den positive terminalen, og dens molekylstørrelse bestemmer graden av bevegelse i agarosegel. Dette er det prinsipp som brukes i elektroforese og store partikler viser en langsommere bevegelse etter hvert som de manipulerer gjennom agar gel-nettverk i sammenligning med små. Analysene av ekstracellulære viruspartikler i insektcellekultur-supernatantene på den tredje dag av elektroforese kan være en betydelig monitor for transfection.Discussion Dette antyder at innføringen av virusgenomet påvirkninger arrest av vertscellen som gjennomgår mitose i S-fase, som fører til unormalt store kjerner, og andre CPE, gjennom endring av cellulær kontroll av DNA replikasjon. Fra resultatene av viruset ikke stimulerer en "ukontrollert" cellulær DNA-replikasjon, og deretter ekstra gener som kan være ansvarlig for regulering av både baculovirus og cellulær DNA-replikasjon. Ved rest fase G2 /M av SF9-celler, indusert av patogen, er det samtidig deteksjon av høye nivåer av både cdc2-assosierte histon H1-kinaseaktivitet og cyclin B protein. En dag etter infeksjon cyclin B forsvant, men cdc2-forbundet histon H1 kinase aktivitet skjedde i hele prosessen (Mann og King, 1989). Således forlenget regulering av celle motosis er på grunn av protein (er) kodet for av AcMNPV etter den første tidsmessige cyclin B /cdc2 regulation.DNA hybridisering analyse viser at maksimal viral DNA replikasjon finner sted før G2 /M fase rest, når cellulær DNA-replikasjon er aktiv. Men fortsatte replikasjon av virus-DNA som forekommer flere timer etter arrest indikerer at, gjør baculovirus genomet ikke er avhengig av vertscelle-DNA-replikasjon for å formere seg. Dette bifasisk natur AcMNPV infeksjon er organisert for maksimal viral DNA replikasjon og boculovirus modning tidlig på infeksjon, men på senere stadier av infeksjon prosessen med genregulering er rettet for optimal modning av okkluderte form for viral genome.Viral DNA replikasjon også var ikke vesentlig endret ved den innføres inhibitoren fdUrd behandling, og de fortsetter å forårsake CPE på Sf9-celler. Det kan konkluderes med at smitte og transfeksjon av vertsceller (SF9) med et virusgenom som fører til utvikling av en smittsom baculovirus avkom, som vist ved CPE (Volkmanet al, 1976) .Conclusion Både den positive kontrollen og de transfekterte vertsceller i studien viser CPE av vakuolisering, polyhedron, celle utvidelse og korning. Endringene blir ikke sett i den negative kontroll, hvor det virale genomet ikke innføres i vertscellene. Disse undersøkelsesresultater indikerer at på transfeksjon av boculovirus DNA-materiale inn i SF9 vertscellene, er det en forekomst av en aktiv infeksjon av disse cellene som demonstrert av cellen patologi (Mann og King, 1989). Dette gir en konklusjon om at transfeksjon med baculovirus genetisk materiale fører til utvikling av en etterfølgende smittsom baculovirus avkom i SF9-celler. Dette er meget viktig da forsøket kan anvendes i produksjon av biologiske pesticider som er meget helse i den moderne økologisk landbruk. Som kloning kan utføres for å produsere et avkom av baculovirus som er rettet mot visse typer insekter således sikker og helse kontroll av plantevernmidler kan oppnås i motsetning til skadelig bruk av kjemiske pesticider i samfunnet.