Embryo freezing
embryo freezingMammalian embryoer har vært vellykket frosset og lager siden 1972, da Whittingham ET en Embryo freezinguse for eggløsning stimulering teknikker for å gjøre bedre og forenkle menneskelig IVF førte til gjenvinne store mengder egg og dermed embryoer. For å begrense risikoen for flere svangerskap som oppstår ved overføring in utero utal embryoer og for å unngå sløsing av overtallige befruktede egg, ble videreutvikling av embryo nedfrysing initiert for mennesker. De første menneskelige embryoer gnag var på slutten av 1970-tallet (Edwards og Steptoe, 1980) med den første svangerskap rapportert i 1983 i Australia (Trounson og Mohr, 1983). Da menneskelig embryo frysing utstrekning raskt og ble en uunnværlig forlengelse av IVF, ved hjelp av optimalisert og forenklede biologiske fremgangsmåter, f.eks bruk av propandiol og sukrose som cryoprotectants for pronucleate oocyes og i god tid spaltede embryoer (Lass et. al., etter 1985) og glyserol og sukrose for blastocyster. Inntil nå, protokoller ha hovedsakelig består en svak frysepunktet ned til -40 ° C og en rask tining. Dette til tross for flere forsøk på å vitrifisere både befruktede egg og ubefruktede egg, med en viss suksess, men ingen reell gevinst i dag. Embryo overlevelse Embryo survivalability av en fryse programmert evalueres først på den morfologiske integritet av embryoet ved tining; andre på sin effektivitet ytterligere å henge fast in vitro Hotell og fremst in vivo. Tidlig spaltede embryoer er å tenke alvorlig å ha overlevd den fryse-tine prosessen når de holder minst halvparten av deres opprinnelige blastomeres intakte etter opptining og fortynning av cryprotectants (overlevelsesrate = 50%). Overlevelsesgraden, når å skille resultatene av en fryse programmert, blir uttrykt som prosentandelen av overlevende fostre blant alle gnagende og tint embryoer. Det viser vanligvis minst 65% av tinte embryoer. Pronucleate eggceller anses å ha overlevd den gnager -thaw prosessen når de vises intakt etter tining, med en lys cytoplasma og ingen sone pellucid brudd, og når de er i stand til å spalte in vitro Blastocyst overlevelse er vanskeligere å vurdere, med tanke på antall celler og deres spesialisering. Det er vanlig å anbefale senere i tid tining å flytte i utero
hentet levende mus etter overføringen av frossen-tint moral. Cryotechnology avledet fra nagende ble brukt til kveg industrielt og representerer, siden 1980, > 100 000, embryo overføringer per år i verden.
av
løpet av neste 24 timer av kultur.
bare morfologisk vanlige blastocyster som har re-utvidet etter 3-4 timer med utvinning ved 370 C i kulturmediet.